1、儀器具體介紹:
4D細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)模塊化設(shè)計(jì),由Core unit(核心單元),和X unit(X功能單元),和/或Y unit(Y功能單元)等功能單元組成,每個(gè)功能單元適合于不同的應(yīng)用需求。
型號(hào):4D
廠家:德國Lonza公司
組成:- Core unit(核心單元:為4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)提供脈沖;
- X unit(X單元):支持不同規(guī)格、不同細(xì)胞數(shù)的轉(zhuǎn)染平臺(tái);適用于在 16-孔貼壁電轉(zhuǎn)板條中的原位貼壁轉(zhuǎn)染;
- Y unit(Y單元)——提供24-孔細(xì)胞培養(yǎng)板中的原位貼壁核轉(zhuǎn)染平臺(tái)
功能搭配:
- 核心單元和各功能單元可以平行拼接或疊放;
- 靈活地選擇和組裝4D細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng);
- 可操控軟件:實(shí)驗(yàn)者根據(jù)實(shí)驗(yàn)需求,可以自己設(shè)計(jì)和存儲(chǔ)實(shí)驗(yàn)設(shè)置;
- USB接口與電腦連接:軟件升級(jí)和數(shù)據(jù)傳送,如實(shí)驗(yàn)者可以通過電腦預(yù)先定義實(shí)驗(yàn)設(shè)置;
- 可接駁96孔shuttle轉(zhuǎn)染儀
2、配套轉(zhuǎn)染試劑盒:
4D-Nucleofector細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)采用導(dǎo)電性聚合物,取代了金屬鋁離子,保證高效轉(zhuǎn)染的同時(shí)獲得高的細(xì)胞存活率。
技術(shù)專利
專利的導(dǎo)電性聚合物電轉(zhuǎn)杯和電轉(zhuǎn)板條
- 專利的導(dǎo)電性聚合物材料替代傳統(tǒng)的金屬鋁離子電極
- 克服傳統(tǒng)金屬電極釋放的金屬離子(Al3+對(duì)細(xì)胞的毒性)對(duì)轉(zhuǎn)染效果的影響。
- 提高(或維持)轉(zhuǎn)染效率的同時(shí),保證細(xì)胞的生理特性。
- 規(guī)格:?jiǎn)慰纂娹D(zhuǎn)杯(100μl)/16孔電轉(zhuǎn)板條(20μl)/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
品種:
X功能單元核轉(zhuǎn)染試劑盒
- 3種細(xì)胞系轉(zhuǎn)染試劑盒:SE, SG, SF電轉(zhuǎn)液;
- 5種原代細(xì)胞轉(zhuǎn)染試劑盒:P1, P2, P3, P4, P5電轉(zhuǎn)液
- 2種優(yōu)化轉(zhuǎn)染試劑盒
Y功能單元原位貼壁核轉(zhuǎn)染試劑盒
- 原位貼壁核轉(zhuǎn)染試劑盒AD1:神經(jīng)元原位貼壁轉(zhuǎn)染;
- 原位貼壁核轉(zhuǎn)染試劑盒AD2
種類:
組成:
- 細(xì)胞特異性核轉(zhuǎn)染液
- 添加劑
- pmaxGFP陽性質(zhì)粒
- 單孔電轉(zhuǎn)杯(100μl)/16孔電轉(zhuǎn)板條(20μl)/24-孔浸入電極板(350 μl/孔)
- 塑料吸管(與單孔電轉(zhuǎn)杯配套)
規(guī)格:多種規(guī)格,如12RCT、24RCT、32RCT、64RCT、96RCT等
3、原位核轉(zhuǎn)染技術(shù):“原位核轉(zhuǎn)染技術(shù)”突破了傳統(tǒng)電穿孔技術(shù)只能在細(xì)胞懸液中轉(zhuǎn)染的缺陷,實(shí)現(xiàn)了貼壁細(xì)胞在培養(yǎng)的不同階段中直接進(jìn)行轉(zhuǎn)染的核轉(zhuǎn)染。
2010年,Lonza推出了4D系統(tǒng),其中利用X unit的16孔電轉(zhuǎn)板條,推出了第一個(gè)原位核轉(zhuǎn)染試劑盒;
2010年,Lonza推出了適用于96孔shuttle系統(tǒng)的新原位轉(zhuǎn)染試劑盒——96孔電轉(zhuǎn)板條。
2011年,Lonza推出了Y unit,可以直接在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染。
“All-in-one” Process——細(xì)胞培養(yǎng)、轉(zhuǎn)染、觀察和分析都在同一細(xì)胞培養(yǎng)板中或電轉(zhuǎn)板中實(shí)現(xiàn)。
分離后的原代神經(jīng)元直接接種到鋪有多聚賴氨酸的24孔培養(yǎng)板中或電轉(zhuǎn)板條中。神經(jīng)元細(xì)胞能貼壁培養(yǎng)多達(dá)14d,并在培養(yǎng)過程的任何時(shí)間點(diǎn)進(jìn)行轉(zhuǎn)染或多次轉(zhuǎn)染。
優(yōu)勢(shì):
– 可在神經(jīng)元貼壁生長(zhǎng)的任何階段進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染或多次進(jìn)行原位核轉(zhuǎn)染
– 原位轉(zhuǎn)染前、中、后,神經(jīng)元都培養(yǎng)在24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中,維持貼壁生長(zhǎng)的生理狀態(tài)
– 唯一轉(zhuǎn)染效率最高可達(dá)70%的非病毒轉(zhuǎn)染方法
– 整個(gè)過程維持了細(xì)胞功能
– 適用于共聚焦顯微鏡下觀察和分析
(1)、24孔細(xì)胞培養(yǎng)板中貼壁細(xì)胞的原位核轉(zhuǎn)染技術(shù):4D細(xì)胞核轉(zhuǎn)染系統(tǒng)-Y功能單元
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